Микоплазмы/уреаплазмы: способы диагностики

Микоплазмы являются самыми мелкими известными бактериями. Их жизнь зависит от клеток организма, в котором они обитают. Для диагностики микоплазменной инфекции могут быть использованы определенные методы.

Методы диагностики инфекций

ureaplazm_pic1.jpgДля диагностики инфекций существуют прямые и непрямые методы. Прямые методы позволяют выявить инфекционный агент в материале. К ним относится ПЦР, бактериологическое исследование, микроскопия и другие. К непрямым относится определение антител в крови (то есть определение не самого инфекционного агента, а иммунного ответа на него), выявление биохимических маркеров и т.д.. Для каждой инфекции существует свой стандарт диагностики.

ureaplazm_pic2.jpgУреаплазмы

Уреаплазмы (Ureaplasma) – представители класса Mollicutes, семейства Mycoplasmataceae. Семейство включает в себя несколько родов, в том числе, род Ureaplasma и род Mycoplasma. Таким образом, можно выделить несколько видов генитальных микоплазм: U. Urealyticum (биовар 2, включает в себя несколько серотипов – 2, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13), U. Parvum (биовар 1, включает в себя несколько серотипов – 1, 3, 6, 14), M. hominis и M. Genitalium. Подробнее: Taxonomy Browser

Смотрите также «Изменение представлений об уреаплазмах».

Ни одна группа прокариот не была вовлечена в такое количество споров и дискуссий, как эта. Даже несмотря на растущие объемы данных об их инфекционном и патогенетическом потенциале, микоплазмы все еще вызывают впечатление группы таинственных микроорганизмов. Однако они являются эволюционно продвинутыми прокариотами и их элитный статус бактериальных патогенов "следующего поколения" требует новых парадигм для полного понимания их патогенного потенциала.

Микоплазмы являются самыми мелкими известными бактериями. Микоплазмы – потомки грам-положительных бактерий, в процессе эволюции сократившие свой геном и лишившиеся клеточной стенки. Отсутствие ригидной клеточной стенки позволяет им проходить через мельчайшие отверстия, быть устойчивыми к антибиотикам, действующим на клеточную стенку. Геном микоплазм – пример крайней биологической экономичности. Отсутствие многих важных генов ведет к тому, что микоплазмы ведут паразитический образ жизни, они зависимы от поставок таких веществ как аминокислоты, нуклеотиды, жирные кислоты и так далее. Их жизнь зависит от клеток организма, в котором они обитают.

Уреаплазма передается преимущественно половым путем. Инфицированность женщин, живущих половой жизнью, достигает 60-80. Уреаплазма часто не вызывает заболеваний, но ее наличие имеет значение для беременных женщин и женщин, планирующих беременность, для новорожденных, а также при наличии клинической картины заболевания.


Основные методы выявления уреаплазм – прямые. Определение антител к уреаплазмам практически не используется.

ПЦР: быстрый метод с высокой чувствительностью и 100% специфичностью*, возможность определения вида уреаплазмы. Типирование уреаплазмы является важным, так как каждый из видов имеет свою клиническую значимость. Кроме того, при ПЦР-диагностике, в отличие от посева, определяются не только живые, но и мертвые микроорганизмы. * 100 % специфичность означает, что если результат положительный, то уреаплазма присутствует в пробе. Высокая чувствительность означает, что при минимальном количестве уреаплазм в пробе они могут быть определены данным методом.

Бактериологическое исследование (культуральный метод, выделение культуры уреаплазм) является менее чувствительным методом, не позволяет определить вид уреаплазмы, кроме того, тест проводится дольше ПЦР. Особенности строения и физиологии уреаплазм, о которых написано выше, делают анализ довольно сложным: микоплазмы очень капризны, они трудно культивируются, для них требуется специальные среды, они плохо переносят транспортировку. Даже в идеальных условиях научной лаборатории чувствительность не достигает высоких цифр (до 50%), специфичность могла бы достигать 100%, если бы не присутствовал фактор субъективности в оценке микробиологических препаратов. M.genitalium культивируется сложнее других микоплазм, очень медленно растет на питательных средах, поэтому посевы не применяются в клинической практике.

Сравнение чувствительности:
Кратко
Полная статья

К достоинствам бактериологического метода относят определение титра уреаплазм и возможность определить чувствительность к антибиотикам.
Попробуем разобраться с этими тезисами. Рекомендации по поводу назначения лечения («Междисциплинарный российский консенсус по генитальным микоплазмам» (2006 г.) ) включают в себя назначение лечения при титре уреаплазм более 10^4 КОЕ/мл (цифра, получаемая в результате бактериологического исследования). Предполагается, что полученный титр соответствует содержанию уреаплазм в организме. Реально же при бактериологическом исследовании определяется количество в забранном материале, а это не то же самое, что количество во влагалище. Это зависит и от качества соскоба, и от количества слизи, и от многих других факторов. Кроме того, концентрация уреаплазм меняется в течение менструального цикла, зависит от приема лекарственных средств и т.д. Поэтому количественный анализ на уреаплазмы является довольно условным методом и его результат не должен быть основанием для назначения или неназначения лечения.


Посевы с определением чувствительности (резистограммой) используются только в научных целях для выработки оптимальных принципов лечения микробных ассоциаций. Это связано с тем, что микоплазмы относятся к трудным для культивирования микроорганизмам, плохо переносящих транспортировку и требующих особых условий для культивирования. Еще одной проблемой является очень медленное размножение некоторых микоплазм в культуре (например, M. genitalium). Определение чувствительности к антибиотикам in vitro не отражает реальной ситуации чувствительности или устойчивости всей микробной ассоциации к антибиотикам in vivo, поэтому не может являться методом исследования, на основании которого будет назначаться лечение.


Когда проводить обследование?


ureaplazm_pic3.jpg
Ureaplasma sows dissent between physician brothers
Уреаплазма вызвала раскол между братьями врачами


Показания к обследованию на микоплазмы (уреаплазмы):

  • Подготовка к беременности
  • Беременность
  • Наличие симптомов воспалительных заболеваний органов малого таза (уретрит, кольпит и др.)
  • Наличие симптомов бактериального вагиноза
  • Изменения в результатах дополнительных методов обследования (см.ниже)
  • Бесплодие, невынашивание беременности, осложнения беременности
  • Выявление у партнера инфекционного агента

Учитывая значимость микоплазм в развитии воспалительных процессов мочеполовых органов у мужчин и женщин, риски связанные с ролью кольпита и баквагиноза в развитии преждевременного излития вод и некоторых других осложнений беременности, предпочтительным методом обследования является ПЦР.

В западных рекомендациях при наличии признаков воспалительных заболеваний органов малого таза или бактериального вагиноза рекомендуется проведение следующих анализов: микроскопия отделяемого (гинекологический мазок у женщин или мазок из уретры у мужчин), мазки для выявления гонококков, трихомонад, хламидий. Мы рекомендуем проводить более чувствительную ПЦР-диагностику этих инфекций. При явной клинической симптоматике воспалительного заболевания в отсутствии гонококков, трихомонад и хламидий говорят о так называемых нехламидийных негонококковых уретритах и других воспалительных процессах.
Выделение нехламидийных негонококковых воспалителных процессов является очень важным в клиническом отношении, поскольку подчеркивает значение микробных ассоциаций в развитии воспаления. Очень трудно бывает выделить отдельно роль каждого микроорганизма в развитии воспалительного процесса. Общее лечение бактериального вагиноза приводит к значительному уменьшению популяций потенциально патогенных микробов. Поэтому при микробных ассоциациях с участием микоплазм значительное улучшение часто наступает при применении препаратов метронидазола или клиндамицина, напрямую не действующих на микоплазмы, но устраняющих условия для благоприятного выживания микоплазм в организме.


«Лечить или не лечить?»


Лечение при положительном результате ПЦР (уреаплазмопозитивности) или бактериологического исследования (посева) нужно не всегда. На первом месте должна быть степень клинических проявлений воспалительного процесса и клинический контекст (например, беременность, наличие активности воспалительного процесса органов малого таза, выделений, симптомов уретрита и т. д.).

ureaplazm_pic4.jpgОсновными показаниями к лечению являются следующие случаи выявления уреаплазмы:
  • Инфекция, вызванная уреаплазмами (признаки урогенитальной инфекции без выявления других агентов, которые могли бы вызвать заболевание).
  • Беременность
  • Планирование операций на органах мочеполовой системы

Для каждого случая необходимость лечения должна оцениваться лечащим врачом. Решение о лечении принимается на основе оценки клинической картины и комплекса данных обследования.
Лечение назначается не на основании резистограммы, а на основании рекомендаций лечения негонококковых нехламидийных воспалительных процессов, вызванных микробными ассоциациями с участием микоплазм. Центр иммунологии и репродукции регулярно отслеживает публикации, посвященные изучению чувствительности таких микробных ассоциаций к антибактериальным препаратам, и использует эти данные в своей практике. В связи с устойчивостью микроорганизмов к антибиотикам и сильной зависимостью от общего состояния микрофлоры не всегда удается добиться эрадикации микроорганизмов даже при назначении современных схем лечения. Слишком настойчивое лечение микоплазм может привести к осложнениям лечения.

Сдача анализа методом ПЦР + дополнительное обследование + консультация гинеколога

Приложение:
Диагностика урогенитальных инфекций
У мужчин У женщин
Внешний осмотр, пальпация Внешний осмотр, пальпация
Микроскопия мазка из уретры, микроскопия сока простаты Микроскопия гинекологического мазка
(при микроскопии микоплазмы/уреаплазмы не могут быть видны из-за малого размера, но микроскопия позволяет оценить количество лейкоцитов и в некоторых случаев выявить бактерии).
Общий анализ мочи Общий анализ мочи
Спермограмма  
Ультразвуковое исследование простаты и органов мошонки Ультразвуковое исследование органов малого таза
Диагностика урогенитальных инфекций методом ПЦР, в том числе выявление:
  1. гонококков
  2. трихомонад
  3. хламидий 
  4. Ureaplasma urealyticum
  5. Ureaplasma parvum
  6. Mycoplasma hominis
  7. Mycoplasma genitalium

Диагностика урогенитальных инфекций методом ПЦР, в том числе выявление:

  1. гонококков
  2. трихомонад
  3. хламидий 
  4. Ureaplasma urealyticum
  5. Ureaplasma parvum
  6. Mycoplasma hominis
  7. Mycoplasma genitalium

Другие статьи раздела

  • Chlamydia и Chlamydophila
    Современная классификация семейства Chlamydiaceae (хламидии, хламидофилы)
  • Human papillomavirus, HPV, папилломавирус человека, ВПЧ
    ПВИ (папилломавирусная инфекция) – инфекция, вызываемая папилломавирусом человека (ВПЧ, HPV – human papillomavirus). Относится к числу инфекций, передаваемых половым путём. Заражение возможно при половом контакте (вагинальном, анальном, оральном сексе), прямом контакте кожи с поражёнными органами. Дети могут заразиться от инфицированной матери трансплацентарно или во время родов (перинатальный путь заражения). Поражение клеток трофобласта может приводить к спонтанному прерыванию беременности. Передача вируса от матери к плоду может иметь следствием возникновение у ребёнка папилломатоза гортани.
  • Авидность (авидитет) и аффинность (аффинитет)

    Авидность (от avidity – жадный) – это оценка свойства антител IgG связывать антиген (чужеродное вещество). Молекула антигена имеет несколько участков, с которыми связываются антитела – эпитопов. Прочность связи с одним из этих участков характеризуется свойством аффинности.

  • Бактериальный вагиноз
    Бактериальный вагиноз (дисбактериоз или дисбиоз влагалища) - состояние, которое развивается вследствие нарушения баланса микрофлоры влагалища. В норме влагалищная флора представлена лактобактериями.
  • Вирус ветряной оспы и опоясывающего герпеса (вирус варицелла-зостер). Ветряная оспа. Ветряная оспа и беременность
    Вирус ветряной оспы (VZV) относится к ДНК-содержащим герпес-вирусам. Он очень заразен, передается воздушно-капельным путем, сопровождается лихорадкой, сыпью и общим недомоганием. Считается, что иммунитет сохраняется пожизненно.
    Первичное заражение опасно при беременности.
  • Герпесвирусы
    Герпесвирусы (от греч. "herpes" – ползучее поражение кожи) – группа ДНК-содержащих вирусов, содержащая более 100 типов, 8 из которых поражают человека.
  • Диагностика инфекций, вызванных парвовирусом B19
    Парвовирусная инфенкция - заболевание, вызываемое парвовирусом В19. Передаётся воздушно-капельным путём, часто протекает бессимптомно. 
    Во время беременности опасно первичное заражение. 
  • Заболевания/инфекции, передающиеся половым путем (ЗППП, ЗПП, ИППП, ИПП). Урогенитальные инфекции. Венерические заболевания. Анализы на ЗППП. Анализы после незащищенного секса. Оральный секс.

    Заболевания, передающиеся половым путем (ЗППП) и инфекции, передающиеся половым путем (ИППП) обозначают состояния, связанные с инфекционными агентами, передающимися преимущественно половым путем (в том числе, ими можно заразиться через оральный секс). Эти термины употребляются чаще, чем термин «венерические заболевания». Более корректным названием является «инфекции, передающиеся половым путем», так как не всегда наличие инфекции приводит к заболеванию, но человек может распространять возбудителя.

  • Иммуноблот
    Блоттинг (от английского blot – пятно) – методики выявления белков, которые обеспечиваются нанесением на какой-либо носитель разделенных молекул (например, антигенов).
  • Микрофлора влагалища
    Влагалище не является стерильной средой. Во влагалище, так же, как и в кишечнике и  на коже  - множество различных микроорганизмов. Основой микрофлоры являются молочно-кислые бактерии.